1.原料因素:
氨基酸純度:氨基酸是多肽合成的基本單元,其純度不足會(huì)導(dǎo)致雜質(zhì)混入,影響多肽的純度和質(zhì)量。例如,消旋化的氨基酸會(huì)使合成的多肽中存在錯(cuò)誤的氨基酸構(gòu)型。
溶劑質(zhì)量問題:溶劑用于溶解反應(yīng)物和清洗樹脂等,如果溶劑中含有雜質(zhì)或水分,可能會(huì)與反應(yīng)物發(fā)生副反應(yīng),影響多肽合成的效率和質(zhì)量。比如在Fmoc固相合成中,常用的DMF等溶劑若含有少量水,會(huì)水解活化的氨基酸。
2.設(shè)備因素:
電磁閥故障:電磁閥控制液路的串聯(lián)與閉路,在氨基酸轉(zhuǎn)移與量取、溶劑轉(zhuǎn)移與量取過程中起著關(guān)鍵作用。電磁閥出現(xiàn)故障可能導(dǎo)致液體流動(dòng)不暢、量取不準(zhǔn)確等問題,影響合成的準(zhǔn)確性。
感應(yīng)器精度問題:感應(yīng)器用于監(jiān)測(cè)反應(yīng)過程和液體量取等,如果感應(yīng)器精度不夠或出現(xiàn)偏差,會(huì)導(dǎo)致對(duì)反應(yīng)條件的監(jiān)測(cè)不準(zhǔn)確,進(jìn)而影響多肽合成的效果。
機(jī)械部件磨損:如攪拌裝置、傳動(dòng)裝置等機(jī)械部件的磨損會(huì)影響反應(yīng)的均勻性和穩(wěn)定性,導(dǎo)致多肽合成效率降低或產(chǎn)物質(zhì)量不一致。
3.環(huán)境因素:
溫度變化:多肽合成反應(yīng)通常在一定的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行,溫度過高或過低都會(huì)影響反應(yīng)速率和平衡,導(dǎo)致副反應(yīng)增加或反應(yīng)不全。例如,高溫可能加速氨基酸的消旋化,低溫則可能使反應(yīng)速度變慢。
濕度影響:濕度過高可能導(dǎo)致溶劑吸濕,影響反應(yīng)體系的濃度和反應(yīng)活性,同時(shí)也可能引起一些對(duì)水敏感的反應(yīng)物或產(chǎn)物的降解。
4.人為因素:
操作失誤:操作人員在使用多肽合成儀時(shí),如果操作不當(dāng),如加料順序錯(cuò)誤、量取不準(zhǔn)確、反應(yīng)時(shí)間控制不當(dāng)?shù)?,都?huì)導(dǎo)致合成結(jié)果出現(xiàn)偏差。
參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤:不同的多肽合成需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置合適的參數(shù),如氨基酸的用量、反應(yīng)時(shí)間、溫度等。如果參數(shù)設(shè)置不合理,會(huì)影響多肽的合成效果。
